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SEM掃描電鏡5種常用的生物樣品干燥方法介紹

日期:2024-07-29 11:24:17 瀏覽次數(shù):66

掃描電鏡在觀察生物樣品時(shí),要求樣品B須干燥,以避免在高真空環(huán)境中產(chǎn)生劇烈汽化,影響真空度、污染樣品或破壞樣品的微細(xì)結(jié)構(gòu)。以下是五種常用的生物樣品干燥方法介紹:

1. 自然干燥法

基本描述:
自然干燥法是指樣品中的水分在大氣中自然蒸發(fā),或樣品經(jīng)脫水處理后脫水劑自然揮發(fā)而干燥的方法。這種方法適用于含水量較少、不易變形的樣品,如干種子、果殼、某些干花粉、長(zhǎng)期保存的昆蟲針插標(biāo)本等。

優(yōu)缺點(diǎn):

優(yōu)點(diǎn):簡(jiǎn)便易行,無(wú)需特殊設(shè)備,成本較低。

缺點(diǎn):干燥速度較慢,且對(duì)于含水量較多的動(dòng)植物組織、游離細(xì)胞等樣品,自然干燥過(guò)程中表面張力可能導(dǎo)致樣品變形。

臺(tái)式掃描電鏡ZEM15.jpg

2. 烘干干燥法

基本描述:
烘干干燥法是將樣品置于烘干箱中,通過(guò)控制溫度和時(shí)間來(lái)去除樣品中的水分。一般溫度控制在80℃以下,烘干程度以含水量在5%以下為好。

優(yōu)缺點(diǎn):

優(yōu)點(diǎn):干燥速度較快,適用于不易變形且耐熱的樣品,如淀粉粒、孢子粉等。

缺點(diǎn):高溫可能導(dǎo)致部分樣品成分損失或變形,不適用于熱敏性樣品。

3. 臨界點(diǎn)干燥法

基本描述:
臨界點(diǎn)干燥法是利用物質(zhì)在臨界狀態(tài)時(shí),液體和氣體的密度相等,氣液界面完全消失,液體的表面張力系數(shù)為零的特性,使樣品的液體完全汽化并以氣體方式排掉,從而達(dá)到完全干燥的目的。這種方法需要特殊設(shè)備——臨界點(diǎn)干燥儀。

優(yōu)缺點(diǎn):

優(yōu)點(diǎn):能較好地保存樣品的微細(xì)結(jié)構(gòu),減少干燥引起的變形。

缺點(diǎn):設(shè)備昂貴,操作復(fù)雜,且仍存在一定的變形風(fēng)險(xiǎn)(約5%)。

4. 冷凍干燥法

基本描述:
冷凍干燥法是將含水樣品放入低溫環(huán)境中冷凍,然后使用真空技術(shù)使樣品中的水分直接由冰升華成水蒸氣,從而達(dá)到干燥的目的。這種方法避免了水分在液態(tài)時(shí)表面張力對(duì)樣品的損傷。

優(yōu)缺點(diǎn):

優(yōu)點(diǎn):無(wú)需脫水處理,減少了樣品變形的風(fēng)險(xiǎn);適用于含水量高、熱敏性強(qiáng)的樣品。

缺點(diǎn):設(shè)備復(fù)雜,操作時(shí)間長(zhǎng),且易產(chǎn)生冰晶損傷(特別是在直接冷凍干燥時(shí))。

5. 真空干燥法

基本描述:
真空干燥法是將經(jīng)脫水的樣品置于真空容器中進(jìn)行干燥。常用的真空干燥法包括以叔丁醇為升華介質(zhì)的叔丁醇干燥法等。這種方法結(jié)合了冷凍干燥和真空技術(shù)的優(yōu)點(diǎn),既保留了冷凍干燥法的優(yōu)點(diǎn),又避免了冷凍處理可能帶來(lái)的損傷。

優(yōu)缺點(diǎn):

優(yōu)點(diǎn):干燥速度快,對(duì)樣品損傷小,適用于多種生物樣品。

缺點(diǎn):需要特殊設(shè)備,且有機(jī)溶劑可能對(duì)樣品成分有抽提作用。

總結(jié)

在選擇生物樣品干燥方法時(shí),應(yīng)根據(jù)樣品的特性(如含水量、熱敏性、微細(xì)結(jié)構(gòu)等)、觀察要求和設(shè)備條件來(lái)綜合考慮。對(duì)于大多數(shù)生物樣品而言,臨界點(diǎn)干燥法和冷凍干燥法因其能較好地保存樣品微細(xì)結(jié)構(gòu)和減少變形風(fēng)險(xiǎn)而被廣泛應(yīng)用。然而,這兩種方法也存在一定的局限性,如設(shè)備昂貴、操作復(fù)雜等。因此,在實(shí)際應(yīng)用中應(yīng)根據(jù)具體情況靈活選擇。

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